这幅画中的蒙娜•丽莎也许可以揭示内心的欢乐、体现青春的活力罢了，但其中似乎不泛某种懒散或者倦慵的意味；画中的蒙娜•丽莎至少是会心的、舒畅自然的，可又多少像是掺和了些许勉为其难的东西；画中的蒙娜•丽莎是快意和满足的，然而那儿难道没有仿佛掠过一丝苦涩？
总的说来，这幅画中的蒙娜•丽莎还是诚挚和矜持的，不过这又似乎包含点挑逗的野性成分；蒙娜•丽莎无疑是自信的、胸有成竹的，又不免带上了一丝嘲讽、一丝揶榆、一丝轻蔑、……
蒙娜•丽莎的微笑是神秘的，其性质也许就在难于确定和两可之间，在既非暗示、亦非隐藏的扑朔迷离之间。蒙娜•丽莎只留一点信息于那迷般的微笑里，让你伤透脑筋，遐思万千……
蒙娜•丽莎这双似喜犹嗔的眼睛，这张似启但终于未启的嘴唇，是形成少妇“神秘微笑”的主要因素。
蒙娜•丽莎有无穷沉思可就是缄口不言，她明白个中奥秘可就是不予以点破，然而，她又不象无动于衷，倒似欲言又止，仅仅把洞悉一切的快感留给自己。
至于蒙娜•丽莎的一双手，实在也充满着性格、充满着灵性，假如去掉这双手，那么蒙娜•丽莎夫人的雍容尊贵可就要大打折扣了。这双手是必不可少的，是可能找到的最佳姿势、最佳位置和最佳角度，因此这双手还被誉之为绘画史上最美丽的一双手。
经过两次世界大战的灾难后，它仍然是微笑着的。这是惬意的微笑呢，还是无可奈何的微笑呢？是嘲讽的微笑呢，还是蒙娜•丽莎本来长相就如此呢？虽然上面我们已经对蒙娜•丽莎作了个分析，但是单凭这绘画的本身，我认为我们是无法找到答案的，上面的也只不过是个人的一种感受，也许别人又是另外一种感受。
据说列奥纳多•达•芬奇在作此画的时候特地请了个乐师在模特儿的身边弹奏乐曲，并且还请了小丑在一旁表演幽默节目。所以看来应该是快乐的微笑。也据传有的人说年已过百的列奥纳多•达•芬奇还曾爱上了蒙娜•丽莎。
文艺复兴早期，画一般的人物肖像，总是表情严肃，而这幅画中的人物却微笑着。别的肖像画一般只画到胸部就可以了，而且多为侧面画像，但这幅蒙娜•丽莎肖像画却是齐腰，而且是正面，并且一双娴雅的手承担了表现人物内在情感的任务。
又据说人们最初发现蒙娜•丽莎原来是个右眼斜视的模特儿，所以列奥纳多•达•芬奇才让她身体稍微偏点，而端正头部，这样，斜视就被掩盖起来了。后来，人们又发现蒙娜•丽莎当时正在怀孕，她面部有些浮肿，腹部稍微隆起，眼睛上没有高光点，显得精神不够，有些倦怠。
但是，至于蒙娜•丽莎曾怀孕这一点，就连现代著名的美术评论家凯涅斯•克拉克也深信不疑。上个世纪80年代初，一些数学家利用本世纪最重要的发明之一——电子计算机算出：画的面积为4081平方厘米，面部占199。11平方厘米，一只手占169。86平方厘米。根据这些资料，计算机测算出蒙娜•丽莎的身高应该是168到173厘米，完全符合当代人们的标准身高。
另外，计算机还经过多次的颜色分析，根据分析结果，画中的蒙娜•丽莎头部有三个白点排成一行，这可能是珍珠项链的一部分，在创作的时候后来被列奥纳多•达•芬奇抹掉了。以上是美国一个专家小组于1986年运用计算机技术研究出来的最新成果。
至于画中的模特儿到底是谁？历来争论不休，据说是佛罗伦萨某银行家的妻子蒙娜•丽莎，当时的年龄大约在二十四、五岁之间。但是，根据文艺复兴时期美术评论家瓦萨利所著的《美术家列传》所记载，认为蒙娜•丽莎是佛罗伦萨市民乔孔达的第三位妻子，蒙娜•丽莎是玛顿娜•埃丽莎贝特的简称。蒙娜•丽莎出身名门，乔孔达也出身名门，只是由于乔孔达本人是个皮货商。所以《蒙娜•丽莎》之画一直被认为是文艺复兴时期“市民主义”兴起的象征，它抒发了画家列奥纳多•达•芬奇对现实生活的热爱，表现了他的人文主义倾向。可是现在，又有人认为模特儿并非玛顿娜•埃丽莎贝特，而是当时曼都亚的侯妃伊萨贝拉•德斯娣。